实验图:
服务介绍:
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)是机体内广泛存在的一种重要的催化过氧化氢分解的酶。它特异的催化还原型谷胱甘肽(GSH)对过氧化氢的还原反应,可以起到保护细胞膜结构和功能完整的作用。GSH-PX的活性中心是硒半胱氨酸,硒是GSH-PX的必需部分,每克分子酶含4克原子硒。测定GSH-PX的活力可以作为衡量机体硒水平的一项生化指标。
货号 | 名称 | 规格 | 价格(元) |
GM1135 | 谷胱甘肽过氧化物酶 GSH-PX | 反应 | 10 |
实验结果展示:
1、谷胱甘肽过氧化物酶 GSH-PX
实验流程:
(1)样本接收:血清、血浆、组织匀浆、细胞、培养上清。
(2)实验步骤:
1、按照说明书将所需试剂配制好,包括试剂一应用液、试剂二应用液、试剂三应用液、试剂五应用液、1mmol/LGSH溶液、20umol/LGSH标准溶液,打开水浴锅,调至37℃。
2、设定N个非酶管与N个酶管(N为样本数量)。
3、每个管中分别加入0.2ml1mmol/LGSH溶液。
4、在N个酶管中分别加入0.2ml待测样本,37℃水浴预温5分钟。
5、每个管中分别加入0.1ml试剂一应用液,37℃水浴准确反应5分钟。
6、每个管中分别加入2ml试剂二。
7、在N个非酶管中分别加入0.2ml待测样本。
8、用漩涡混匀器将各管充分混匀,3500-4000转/分离心10min。
9、取1ml上清作显色反应。
10、设定N个非酶管、N个酶管、一个空白管与1个标准管(N为样本数量)。
11、在N个酶管与非酶管中分别对应加入1ml第九步取的上清液,空白管中加入等量GSH标准品溶剂应用液,标准管中加入等量20umol/LGSH标准溶液。
12、每个管中分别加入1ml试剂三应用液。
13、每个管中分别加入0.25ml试剂四应用液。
14、每个管中分别加入0.05ml试剂五应用液。
15、混匀,室温静置15min。
16、置于波长412nm处读数,记下数值。
送样运输要求:
1、动植物组织样本(干冰运输)
准确称取动物组织重量按重量(mg):体积(ul)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(推荐0.86%或0.9%的生理盐水),冰水浴条件下,机械匀浆,制备成10%的匀浆液,2500~3000转/分钟,离心10分钟,取上清液进行测定。
2、血清样本(干冰运输)
全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于2-8℃ 3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。
3、血浆样本(干冰运输)
可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8℃3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。
4、细胞样本
贴壁细胞:将细胞用PBS冲洗2次后,用细胞刮将细胞小心刮下来,将培养液3000转/分,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。
悬浮细胞:将培养液3000转/分,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。
细胞上清:标本于2-8℃,3000转/分离心15min取上清,上清立即用于实验,或分装后于-20℃或-80℃保存。避免反复冻融。