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谷胱甘肽过氧化物酶 GSH-PX

价格:¥10

货号:FLD-GM1135

品牌:FLD

规格:反应

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产品介绍

实验图:


  服务介绍:

  谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)是机体内广泛存在的一种重要的催化过氧化氢分解的酶。它特异的催化还原型谷胱甘肽(GSH)对过氧化氢的还原反应,可以起到保护细胞膜结构和功能完整的作用。GSH-PX的活性中心是硒半胱氨酸,硒是GSH-PX的必需部分,每克分子酶含4克原子硒。测定GSH-PX的活力可以作为衡量机体硒水平的一项生化指标。

货号名称规格价格(元)
GM1135谷胱甘肽过氧化物酶 GSH-PX反应10

  实验结果展示:

  1、谷胱甘肽过氧化物酶 GSH-PX


  实验流程:

  (1)样本接收:血清、血浆、组织匀浆、细胞、培养上清。

  (2)实验步骤:

  1、按照说明书将所需试剂配制好,包括试剂一应用液、试剂二应用液、试剂三应用液、试剂五应用液、1mmol/LGSH溶液、20umol/LGSH标准溶液,打开水浴锅,调至37℃。

  2、设定N个非酶管与N个酶管(N为样本数量)。

  3、每个管中分别加入0.2ml1mmol/LGSH溶液。

  4、在N个酶管中分别加入0.2ml待测样本,37℃水浴预温5分钟。

  5、每个管中分别加入0.1ml试剂一应用液,37℃水浴准确反应5分钟。

  6、每个管中分别加入2ml试剂二。

  7、在N个非酶管中分别加入0.2ml待测样本。

  8、用漩涡混匀器将各管充分混匀,3500-4000转/分离心10min。

  9、取1ml上清作显色反应。

  10、设定N个非酶管、N个酶管、一个空白管与1个标准管(N为样本数量)。

  11、在N个酶管与非酶管中分别对应加入1ml第九步取的上清液,空白管中加入等量GSH标准品溶剂应用液,标准管中加入等量20umol/LGSH标准溶液。

  12、每个管中分别加入1ml试剂三应用液。

  13、每个管中分别加入0.25ml试剂四应用液。

  14、每个管中分别加入0.05ml试剂五应用液。

  15、混匀,室温静置15min。

  16、置于波长412nm处读数,记下数值。


  送样运输要求:

  1、动植物组织样本(干冰运输)

  准确称取动物组织重量按重量(mg):体积(ul)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(推荐0.86%或0.9%的生理盐水),冰水浴条件下,机械匀浆,制备成10%的匀浆液,2500~3000转/分钟,离心10分钟,取上清液进行测定。

  2、血清样本(干冰运输)

  全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于2-8℃ 3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。

  3、血浆样本(干冰运输)

  可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8℃3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。

  4、细胞样本

  贴壁细胞:将细胞用PBS冲洗2次后,用细胞刮将细胞小心刮下来,将培养液3000转/分,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。

  悬浮细胞:将培养液3000转/分,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。

  细胞上清:标本于2-8℃,3000转/分离心15min取上清,上清立即用于实验,或分装后于-20℃或-80℃保存。避免反复冻融。