实验图:
服务介绍:
机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基,后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸,引发脂质过氧化作用,并因此形成脂质过氧化物。如:醛基(丙二醛MDA)、酮基、羟基、羰基、氢过氧基或内过氧基,以及新的氧自由基等。脂质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂,即非自由基性的脂类分解产物,而且通过链式或链式支链反应,放大活性氧的作用。因此,初始的一个活性氧能导致很多脂类分解产物的形成,这些分解产物中,一些是无害的,另一些则能引起细胞代谢及功能障碍,甚至死亡。氧自由基不但通过生物膜中多不饱和脂肪酸的过氧化引起细胞损伤,而且还能通过脂氢过氧化物的分解产物引起细胞损伤。因而测试 MDA的量常常可反映机体内脂质过氧化的程度,间接地反映出细胞损伤的程度。MDA的测定常常与SOD的测定相互配合,SOD活力的高低间接反应了机体清除氧自由基的能力,而MDA的高低又间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度,通过SOD与MDA的结果分析有助于医学、生物学、药理及工农业生产的发展。
货号 | 名称 | 规格 | 价格(元) |
GM1134 | 丙二醛 MDA | 反应 | 10 |
实验结果展示:
1、丙二醛 MDA
实验流程:
(1)样本接收:血清、血浆、组织匀浆
(2)实验步骤:
1、按照说明书将所需试剂二、试剂三配制好打开水浴锅,调至95℃。
2、设定N个测定管、N个对照管、1个空白管照管与一个标准管(N为样本数量,若样本不存在溶血、脂血现象,则对照管可以不测,用空白管来代替对照管)。
3、在N个测定管与对照管中分别加入aml样本,空白管中加入等量无水乙醇,标准管中加入等量10nmol/ml的标准品(a根据样本类型不同而不同)。
4、每个管中分别加入aml试剂一(试剂盒中现用)。
5、摇动试管架,将试剂摇匀。
6、每个管中分别加入3ml试剂二。
7、除对照管外每管加入1ml试剂三应用液,对照管加入1ml50%的冰醋酸。
8、用漩涡混匀器将各管充分混匀,95℃水浴(或沸水浴)40min。
9、流水冷却,3500-4000转/分离心10min。
10、取上清,置于波长532nm处读数,记下数值
送样运输要求:
1、动植物组织样本(干冰运输)
准确称取动物组织重量按重量(mg):体积(ul)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(推荐0.86%或0.9%的生理盐水),冰水浴条件下,机械匀浆,制备成10%的匀浆液,2500~3000转/分钟,离心10分钟,取上清液进行测定。
2、血清样本(干冰运输)
全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于2-8℃ 3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。
3、血浆样本(干冰运输)
可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8℃3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。
4、细胞样本
贴壁细胞:将细胞用PBS冲洗2次后,用细胞刮将细胞小心刮下来,将培养液3000转/分,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。
悬浮细胞:将培养液3000转/分,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。
细胞上清:标本于2-8℃,3000转/分离心15min取上清,上清立即用于实验,或分装后于-20℃或-80℃保存。避免反复冻融。