Southern印迹杂交实验服务

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发布者：admin发布时间：2022-06-10浏览量：返回上级

实验原理
Southern 印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的方法。其原理为利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链 DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的DIG标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量。

实验流程
1、制备待测DNA
2、DNA限制酶消化
3、琼脂糖凝胶电泳分离待测DNA样品
4、电泳凝胶预处理
5、转膜
6、探针标记
7、预杂交
8、Southern杂交
9、洗膜
10、放射性自显影检测
11、实验结果分析及报告

客户提供
1、待杂交目标基因序列和含有待杂交基因的阳性质粒（如自带引物，请提供引物：100umol/ul，〉10ul,冰袋运输）。
2、待杂交的高质量DNA样品质量至关重要，决定实验的成败，请确保DNA抽提质量，尽量采用进口试剂盒提取,
A、基因组DNA检测：OD260/OD280=1.8-2.0，基因组要求DNA总量不小于10ug，浓度大于200ng/ul；
B、请提供基因组DNA检测图片，要求无降解，无蛋白污染；
C、检测样品低温运输至公司，或交给当地的业务员或代理商处理
3、客户如果无法提供高品质的基因组DNA样品，本公司可以帮助制备可用于Southern Blot检测的DNA样品，客户提供样品要求如下：
A、菌液：不低于500ul，冰袋或者干冰运输
B、组织：总量不小于100mg，干冰运输
C、细胞：提供新鲜的细胞即可，尽量不要使用盐溶液冲洗
4、请注明基因组DNA酶切方案，如果项目中需要用到非常规的限制性内切酶，需额外加收酶切费用或有客户提供相应的限制性内切酶。

交付结果
1、DNA样品检测报告（实验样品不返还，请注意保留备份）
2、标准实验流程报告
3、southern blot实验结果检测报告

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服务范围SCOPE OF SERVICES

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