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ROS氧化分析
1. ROS:是线粒体由状态Ⅲ向状态Ⅳ转换中高氧的环境和高还原态的呼吸链使大量电子漏出并还原氧分子而形成,活性氧的产生和清除如果失去平衡,常常会造成对人体的损伤。
2. 检测方法:荧光探针法
实验步骤
1. 取细胞经过处理后,PBS清洗去除残余培养基;
2. 去除细胞培养液,每孔加入1ml稀释好的DCFH-DA,37℃细胞培养箱内孵育20min。
3. 用无血清细胞培养液洗涤细胞三次,以充分去除未进入细胞内的DCFH-DA。
4. PBS清洗两次,胰酶消化收集细胞,荧光显微镜进行荧光拍照。
实验周期及交付标准
1. 实验周期:2-3周
2. 交付标准:荧光图片、荧光值、实验报告(实验步骤、试剂、仪器等)
需确认的信息
1. 样本种属及类型(组织还是细胞)
2. 样本数量
3. 是否提供探针
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