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幽门结扎胃酸分泌模型
造模原理:
幽门结扎后,胃液滞留胃内,胃酸和胃蛋白酶作用增强;幽门结扎也使胃窦扩张,反射性刺激促胃液素分泌,引起胃酸分泌过多。
造模方法:
Wistar大鼠,雌雄兼用,150~225g。禁食12小时(自由饮水)后,口服阿司匹林(200mg/ kg),再禁食18小时并腹腔内注射盐酸lv胺酮(50mg/kg)麻醉动物,进行幽门结扎手术。
术后4小时,处死动物,开腹、夹住食管取出胃,小心收集胃液并记录胃液量,测定胃液总酸度、胃蛋白酶活性和黏蛋白量。测定胃组织匀浆中的脂质过氧化物、内源性超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、还原型谷胱甘肽(GSH)。
将胃浸入1%甲醛中10分钟,沿胃大弯剪开胃,观察溃疡点数,计算溃疡指数和溃疡发生率。
结果可见:
阿司匹林加幽门结扎组的溃疡发生率为100%,严重的可见到溃疡深达肌层甚至穿孔。与对照组或雷尼替丁组相比,溃疡指数或等级都明显升高,胃液总酸度、胃蛋白酶活性明显升高而黏蛋白量明显降低。脂质过氧化物浓度明显升高而SOD、CAT和GSH水平都明显降低。
组胺胃酸分泌模型
什么是组胺:
组胺是自体活性物质之一,在体内由组氨酸脱羧基而成,组织中的组胺是以无活性的结合型存在于肥大细胞和嗜碱性粒细胞的颗粒中,皮肤、支气管粘膜、肠粘膜和神经系统中含量较多。当机体受到理化刺激或发生过敏反应时,可引起这些细胞脱颗粒,导致组胺释放,与组胺受体结合而产生生物效应。
目的和原理:
一种连续记录大鼠胃酸分泌 目的和原理:一种连续记录大鼠胃酸分泌的方法。用于评价抗溃疡药对组胺,乙酰 的方法.用于评价抗溃疡药对组胺,乙酰胆碱,和胃泌素刺激胃酸分泌的抑制作用。 胆碱,和胃泌素刺激胃酸分泌的抑制作用.
造模方法:
1.雄性SD大鼠,体重220-250g左右。实验前18h禁食但保持饮水。
2.动物称重,用乌拉坦1.5g/kg进行麻醉,并借助一个热台保持体温恒定。
3.进行气管切开插管,经口插入导管待大鼠.完全麻醉后固定四肢和头部,用内直径2 mm的气管导管插管。剃除颈部鼠毛,用碘伏消毒,75%乙醇脱碘后,纵行剪开颈部皮肤肌层及筋膜,在气管上作“T”型切口后插入气管导管;并用线固定。
4.用6F导管最前端,约7~8厘米用记号笔标记。插管时左手拉紧大鼠舌头,右手持导管(凹面向上,有白色的一端向前), 顺着导管弧度, 紧贴上颚后边一直向前,就可以插进气管。很容易插到食管内.胃导管 端口蠕动泵相连.
5.沿腹中线开腹暴露胃,结扎十二指肠起始端,在胃幽门开口,插入导管并扎紧,经口导管与蠕动泵连接,以37°C生理盐水进行灌流。先以150ml 37°C生理盐水将胃内容物快速冲洗出来,再调整流速1.0ml/min,平衡30min后开始收集胃灌流液。每20分钟收集一个样本,收集前两个样本作为基础.
6.然后通过股静脉用微量注射泵以1.2mI/h的速度恒定输注组胺20μmol/kg/h,组胺给药后2h收集两个样本作为组胺刺激后水平样本,各组动物分别尾静脉注射各组药物,连续180分钟,每20分钟收集一个灌流液样本。
7.所有灌流液样本用0.02M的NaOH进行滴定,以酚酞指示剂变红为滴定终点。将碱式滴定管固定在蝶形铁架台上,倒入碱式滴定液,排除橡胶管和尖嘴内的空气。记录上方液面凹面所在刻度值,将样本倒入50m1锥形瓶内滴入1~2滴酚酞指示剂轻摇混匀,缓慢的捏橡胶管内玻璃珠让碱式滴定液匀速缓慢的滴入锥形瓶内,并在滴入同时不断地轻摇锥形瓶当溶液由无色变成粉色时停止滴定,轻摇两下不褪色(10s不褪色)滴定结束。
实验结果:
大鼠的胃酸基础值维持在较低水平3~5μ方程HCL/20min,给予静脉输注给予组胺100分钟后,胃酸分泌量上升至32uEqHCL/20min左右,给予不同剂量的药物后,引起胃酸分泌不同程度的下降。
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