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鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)是需氧的不发酵糖革兰阴性杆菌,属条件致病菌,主要引起医院获得性肺炎,尤其是呼吸机相关肺炎(VAP),亦可引起血流感染、脑膜炎、腹膜炎、伤口感染等多种感染。
小鼠气管插管操作步骤:
建立在耳窥镜直视下 小鼠气管插管方法。具体步骤如下:
采用1.25%2,2,2三溴乙醇(25mg/Kg)腹腔注射,待小鼠麻醉后仰卧位固定小鼠于啮齿动物工作台 上,采用门 齿环一端钩住小鼠门齿,另 一端固定于操作台, 缓慢倾斜工作台至 45°,操作者右手持直头镊牵拉小鼠舌头,左手持带电池手柄的耳窥镜,耳窥镜尖端深入小鼠舌上,透过耳窥镜的放大镜,操作者可观察到小鼠的声门 随呼吸而开启、闭合。在小鼠声门开启的瞬间,操作者迅速将已安装气管插管的气管内导管插入气道,并退出导管。将喉镜紧贴气管插管口,若喉镜表面有雾气形成表明插管成功。
注射菌液 :
气管插管成功后,沿气管插管注射10ųL鲍曼不动杆菌菌液,吹打3次,确保菌液全进入小鼠肺部。小鼠在啮齿动物操作台 竖立1min后,缓慢放平操作台,将小鼠放回饲养笼中。
肺组织细菌定量:
待麻醉小鼠全部苏醒,颈椎脱臼法处死小鼠,无菌操作取出小鼠两肺,称重后每0.1g肺加入0.9mL生理盐水,组织匀浆机研磨, 取100ųL经系列稀释后接种于LB培养基培养16h后行菌落计数,继而计算出每克肺组织的细菌含量。
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