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RNA干扰/RNAi基因干扰/SiRNA实验服务

发布者：admin发布时间：2022-06-10浏览量：返回上级

RNA干扰（RNA interfering，RNAi）现象是指由与靶基因序列同源的双链RNA(DsRNA)引发的基因转录后的沉默过程，小干扰RNA特异性介导相同序列的mRNA降解，阻断相应基因表达。晶莱生物提供的RAN干扰技术包括化学合成小RNA片段（SiRNA）和构建载体RNA（SnRNA）两种形式。实验委托者只需提供干预基因名称或基因序列ID，晶莱生物免费设计合适的干预位点，保证至少有一对小RNA有效抑制目的基因表达，抑制效率不低于70%。

RNA干扰（SiRNA实验）流程
第一步确定干扰基因，设计并合成合适的小干扰RNA（片段型或载体型小干扰RNA）。
第二步预转染实验，进行细胞培养，摸索转染条件、时间并进行必要的检测（WB、PCR等），确定干预效果最佳的一对小RNA。
第三步正式实验，设置合理实验分组，进行瞬时或稳定转染。
第四步转染后检测，根据实验要求选择细胞生物学检测、蛋白检测、分子生物学检测等。以研究小干扰RNA对于细胞、蛋白或基因功能的影响。

RNA干扰（SiRNA实验）检测
1. 细胞检测：细胞增殖毒性MTT、细胞凋亡、细胞周期、细胞迁移、细胞侵袭；
2. 蛋白检测：免疫印迹WB、免疫细胞化学ICC、免疫荧光IF、流式细胞术FCM、酶联免疫ELSIA；
3. 分子生物检测：RT-PCR、实时荧光定量PCR、甲基化特异性PCR(MSP)；
4. 其他检测：生化检测、酶类检测、脂类检测、糖类检测。

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