透射电镜

Transmission Electron Microscope, 简称TEM，透射电镜可以观察样品的内部精细结构，这些结构即亚显微结构或者超微结构。透射电镜使用的是透射电子，并收集透过样品的电子，从而提供了样品的内部结构的信息，如晶体结构、形态以及应力状态的信息。目前最先进的TEM其空间分辨率达到了pm级别。由于透射电子的要求，TEM的样品必须制备成超薄切片，通常为50-100 nm，样品制备比较繁琐，常用的方法有超薄切片法、冷冻超薄切片法、冷冻蚀刻法、冷冻断裂法等。

实验意义

1.透射电镜是表征各种样品的有力工具，它的多功能性和极高的空间分辨率使其在许多应用中非常有价值。

2.TEM能够观察样品的内部结构，同时在病理诊断中可以补充和纠正光镜诊断的疑难问题，可以提高病理诊断的准确性。

实验步骤

透射电镜生物样品的制备：①取小于1立方毫米的组织；②用2.5%戊二醛（磷酸缓冲液配制）固定2小时，0.1M的磷酸缓冲液漂洗3次×15 min；③1%锇酸固定液固定2小时，0.1M的磷酸缓冲液漂洗3次×15 min；④梯度乙醇进行脱水，4℃进行；⑤包埋：使用纯丙酮+包埋液（2:1）室温处理4小时，纯丙酮+包埋液（1:2）室温过夜，纯包埋液37℃处理3小时；⑥固化：37度烘箱过夜，45度烘箱12小时，60度烘箱24小时；⑦超薄切片机切片，厚度在50 nm左右；⑧3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色；⑨透射电镜观察，拍片。

实验完成周期及交付标准

1. 实验周期：一个月左右

2. 交付标准：电镜图片、病理报告、实验报告（实验步骤、试剂、仪器等）

实验需与客户确认的信息

1. 样本的种属

2. 样本类型，是组织还是细胞

3. 样本数量

4. 透射电镜分析要求、拍照要求或是参考文献