实验原理:利用氧化剂氧化细菌和真菌内的细胞壁内的粘多糖等成分而暴露出醛基,酸基还原六胺银内的银离子为黑色的金属银而显色。同理,肾小球基膜内含有一些多糖成分,易于被氧化露出醃基而被染色。
实验步骤:1、切片经二甲苯5min*2,无水乙醇5min*2、95%乙醇6min*2、85%乙醇5min、70%乙 醇5min完成脱蜡。脱蜡后自来水洗5min。
2、加入1%过.碘.酸水溶液中作用10min»自来水洗,然后蒸憶水洗二次,每次3min。
3、六気银液预热至65t,切片放入其中浸染75min,蒸馅水洗二次,每次3min。
4、用0.1%氯化金调色处理5min,蒸憶水洗二次,每次3min。
5、用5%硫代酸钠处理5min,蒸惘水洗二次,每次3min。
6、用0.5%亮绿复染细胞质。
7、切片再经70%乙醇、80%乙醇、90%乙醇各Imin:经95%乙醇imin,换液重复一次;无水乙醇2min,换液重夏一次快速脱水,后用二甲苯透明5min,换液重复一次。
8、根据盖玻片规格和载玻片上组织多少,滴加适量中性树胶,封片。
操作要求 :1、氧化切片很重要。氧化液种类和浓度、作用时间影响阳性结果的数量。
2、使用的容器应保持清洁,才能保证结果的稳定性。
结果判定: 细菌、真菌的粘多糖成分被染成深黒色,肾小球基膜也被染成深黒色,背景为淡绿色 或无色。