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实验原理
包括siRNA导入优化和质粒转染优化。由于siRNA和RNA干扰载体都需要转入细胞才能发挥作用。因此如何高效地将RNA干扰产品转入细胞是成功进行RNA干扰实验的关键步骤。嘉美实验有专业的siRNA和质粒转染技术,可以对转染效率进行优化,提升RNA干扰效果。
服务内容:
1)293细胞干扰效率验证服务——构建好的RNA干扰质粒转染293细胞,通过荧光定量RT-PCR或者Western-blot验证干扰效率。
2)客户细胞株转染优化和干扰效率验证服务——转染效率是RNA干扰成功的关键步骤。嘉美实验采用Genefection系列转染试剂,通过对转染效率优化提升RNA干扰效率。在客户细胞中验证RNA干扰效率。
3)siRNA干扰效率验证服务——采用siRNA转染试剂进行预转染实验,优化转染效率,通过荧光定量RT-PCR或者Western-blot验证干扰效率。
服务流程:
1)培养细胞
2)优化转染条件:在荧光显微镜下观察转染效率或者用流式细胞检测评估转染效率。
3)根据靶基因序列设计一组RNA干扰序列。
4)采用荧光定量PCR或Western blot评估RNA干扰效率。
5)(可选)用相应抗生素筛选稳定表达shRNA或miRNA的细胞株。
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